使用全自動(dòng)凱氏定氮儀測定食品中的蛋白質(zhì)含量
蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是構(gòu)成人體及動(dòng)植物細(xì)胞組織重要成分。蛋白質(zhì)在人體內(nèi)有構(gòu)成新生組織及制造體內(nèi)氧化還原所需的酶和激素等生命基礎(chǔ)物質(zhì)的用途及作用。食品中的蛋白質(zhì)含量的多少，不僅表示食品的質(zhì)量，而且也關(guān)系著人體健康，因此食品中對(duì)蛋白質(zhì)的含量有一定規(guī)定。食品蛋白質(zhì)含量測定方法常有，凱氏定氮法、酚試劑法、雙縮脲法、及紫外吸收法等。但存在操作比較繁瑣、費(fèi)時(shí)或費(fèi)力。目前我們采用的是基爾特克（DIGESTOR.2006）消化裝置，全自動(dòng)凱氏定氮儀測定食品中的蛋白質(zhì)。
它不僅省時(shí)省力、而且數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，便于檢測和分析研究。下面談?wù)勎覀兪褂迷搩x器的一點(diǎn)體會(huì)。
1.材料與方法
1.1 儀器與試劑
1.1.1 2300 型全自動(dòng)凱氏定氮儀（瑞典 FOSS.TECATOR 公司生產(chǎn)）。
1.1.2 樣品消化爐（瑞典 FOSS TECATOR.DIGESTOR.2006 型）。
1.1.3 400g/L 氫氧化鈉溶液，稱取 4000g 氫氧化鈉溶于 10L 水。
1.1.4 0.1042mol/L 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液。
1.1.5 含溴甲酚綠和甲基紅的 1%硼酸吸收液。取 100g 硼酸溶于 10L 蒸餾水添加 7:10 甲基紅、溴甲酚綠混合指示劑約 28ml（根據(jù)實(shí)際情況酌情處理）1.1.6 基爾特催化片（每片含 3.3gk2so4+0.4gCuso4.5H2O）1.1.7 濃硫酸（GR 或 AR）。
1.2 樣品制備稱量
1.2.1 固體樣品：將樣品磨細(xì)均勻稱取 0.2-2.0g。
1.2.2 半固體樣品糊狀樣品：搖勻稱取 0.5-2.0g。（*對(duì)含糖量較高、水分多樣品先放入消化管在 120C0消化器蒸至近干后消化。防止發(fā)泡、爬壁、粘貼現(xiàn)象。）
1.2.3 液體樣品：搖勻取 1.0-10.0ml.（*同上）1.3 樣品測定。將稱取樣品置入消化管，加消化片兩片，加 12ml 濃硫酸慢慢搖動(dòng)將樣品潤濕。把消化管放入已預(yù)熱至 4200C 的消化器中，消化 60 分鐘，樣品消化呈透明綠色液體。取出冷卻 10-15 分鐘，將消化管放入 2300 型自動(dòng)凱氏定氮儀中。加水 80ml、氫氧化鈉 50ml、吸收液 30ml。關(guān)上安全門待儀器自動(dòng)蒸餾、滴定、計(jì)算并打印結(jié)果。
2. 結(jié)果與討論：
2.1 精密度測定。各取國家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可比對(duì)樣品（CNAC-TO186.大豆樣品 A）5 份，用經(jīng)典方法和全自動(dòng)凱氏定氮儀做對(duì)比試驗(yàn)。
結(jié)果見表 1
兩種方法精密度比較 表 1
上述表 1 測定結(jié)果表明儀器法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差比經(jīng)典方法小，儀器法的精密度明顯比經(jīng)典化方法好。RSD<1%，即表明 2300 型全自動(dòng)凱氏定氮儀的精密度好。
2.2 T 檢驗(yàn)：對(duì)表 1 的數(shù)據(jù)作 t 檢驗(yàn)分析，兩種分析方法總體均數(shù)無顯著差異（t0.05），兩種方法測定食品中蛋白質(zhì)含量不存在顯著性差異。
2.3 準(zhǔn)確度：根據(jù) 2003 型全自動(dòng)凱氏定氮儀儀器要求，精確稱取 GR 硫酸銨（99.9%（NH4）2SO4）若干克置入消化管內(nèi)，加 75ml 蒸餾水和 50ml40%NaOH 溶液。在 FOSS2003 型全自動(dòng)凱儀上直接進(jìn)行蒸餾、滴定，對(duì)儀器氮的回收率進(jìn)行驗(yàn)證。見表 2計(jì)算方法：氮%=回收率%= x100
氮的回收率 表 2
表 2 表明 FOSS2003 型全自凱氏定氮儀回收率在 99%以上，準(zhǔn)確度良好，符合檢驗(yàn)要求。
3. 部份食品中蛋白質(zhì)含量測定結(jié)果。（見表 3）
這批樣品蛋白質(zhì)含量達(dá)標(biāo)為 88%，測定結(jié)果比較滿意。（表 3 測定結(jié)果均為平均值，不達(dá)標(biāo)樣品進(jìn)行復(fù)檢。）
部份食品中蛋白質(zhì)測定結(jié)果 表 3
4.小結(jié)：
全自動(dòng)凱氏定氮儀（儀器法）是在化學(xué)分析的基礎(chǔ)上的改進(jìn)，測定原理兩者相同。相當(dāng)于玻璃儀器整合，并且機(jī)電一體化控制。具有操作簡便、快速、準(zhǔn)確度高、精密度好等特點(diǎn)。它與經(jīng)典方法比較，減少了人為操作誤差因素的影響，測定蛋白質(zhì)結(jié)果令人滿意，可作為優(yōu)選方法使用，具有推廣價(jià)值。
